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400-0588-030

Xeno-Free人类间充质干细胞培养基

市场价:¥2096.00

商城售价:1886.00

所得积分:1886

货 号:AC-1001003

品 牌:埃泽思(Applied Cell)

规格:450ml+50ml

存储条件:4°C

供货时间:现货

数 量:
库存9999件
  • 产品详情

产品基本信息

产品名称

Applied CellTMXeno-Free人类间充质干细胞培养基

货    号

AC-1001003

规    格

基础培养基450mL添加剂50mL

试用装规格

基础培养基36mL添加剂4mL

运输保存条件

基础培养基2-8℃,添加剂-20-80℃;混合后2-8

使用范围

人类骨髓、脂肪脐带等组织来源的间充质干细胞

原代分离、扩增与传代培养

保质期

12个月

产品简介

Xeno-Free人类间充质干细胞培养基?#21069;?#27901;思生物(Applied CellTM)自主研发的一款无外源动物成分的人类间充质干细胞培养基。可应用于人类骨髓、脂肪脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养,并保?#21046;?#22810;向分化潜能。GMP级别生产车间,?#32454;?#25191;行cGMP操作标准,各项指标优于行?#24403;?#20934;。

Xeno-Free人类间充质干细胞培养基主要成分:氨基酸,维生素、无机盐、白蛋白,转铁蛋白、胰?#26680;亍?#24494;量元素,细胞因子?#21462;?/span>

产品特性

l  无外源动物蛋白成分,大大降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险。

l  全程无血清生产,极大降低批次间差异,避免实验条件的重复摸索。

l  培养载体无需包被,直接培养。

l  扩增效率高,24h左右增殖翻倍,节省培养时间。

组分

规格

数量

运输

Human Mesenchymal Stem Cell Basal Medium

人类间充质干细胞基础培养基

450mL

1

冰袋

Human Mesenchymal Stem Cell Supplement

人类间充质干细胞添加剂

50mL

1

干冰

产品内容

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Serum-Free细胞冻存液Applied CellTM: Cat. no.AC-1001005/1001006

人类脐带间充质干细胞Applied CellTM: Cat. no.AC-2001003

人类脂肪间充质干细胞Applied CellTM: Cat. no.AC-2001004

                       

实验准备

人类间充质干细胞培养基配制

1) 37快速解冻人类间充质干细胞培养基添加剂,快速溶解时不易破坏添加剂中营养物质,时间大致为10min。待添加剂融化后缓慢摇匀,分装或直接按比例添加到基础培养基中,分装后添加剂立即储存于-20-80℃,避免反复冻融

2)将添加剂以10%比例加入到人类间充质干细胞基础培养基混匀,?#27425;?/span>人类间充质干细胞培养基AC-1001003人类间充质干细胞培养基AC-1001003可在2-8 稳定储存2-3周,不建议使用?#38597;?#21046;超过3周的培养基。

3)人类间充质干细胞培养基AC-1001003可直接应用于人类骨髓、脂肪脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养,具体操作方法及其他相关技术资料请参?#21450;?#27901;思生物官网。

操作方法(以下步骤皆应在无菌条件下操作)

hMSC细胞复苏(10cm dish)

1.  从液氮中取出冻存的hMSC细胞,迅速将冻存管放入37℃水浴快速融解。

2.     在生物安全柜或超净台中,将解冻后的细胞悬液缓慢加入5 mL预温的人类间充质干细胞培养基(AC-1001003

3.     300g 离心3 min,吸掉上清,加入10ml人类间充质干细胞培养基(AC-1001003重悬细胞。

4.     将细胞均匀铺到培养皿中,水平十字振动培养皿使细胞均匀分布,5% CO237℃恒温细胞培养箱中培养24小时后观察细胞状态。

5.     2天吸掉原来培养基,加入新鲜的人类间充质干细胞培养基(AC-1001003继续培养,每2天更换培养液。

hMSC细胞传代培养

1.     在显微镜下观察细胞,当细胞融合度达到90%,?#32431;?#20256;代。

2.     在超净台/安全柜中,吸走培养瓶中旧的人类间充质干细胞培养基(AC-1001003,加入PBS溶液洗一次,加入人类间充质干细胞消化液(AC-1001024/1001025使之完全覆盖皿/瓶底。

3.     室温孵育5-6分钟或37℃孵育3-5分钟,显微镜下观察到大部分克隆边缘开始脱离皿/瓶底,克隆内部细胞间出现间隙,停止消化。

4.     加入与消化液2倍体积的人类间充质干细胞培养基(AC-1001003中和消化,用移液器轻轻?#33633;?#29942;壁上未完全脱离的细胞,并轻轻?#33633;?#28151;匀,使细胞完全分散。

5.     将细胞悬液转移到15 mL离心管中,1000 rpm离心3 min

6.     弃上清,加入人类间充质干细胞培养基(AC-1001003,重悬细胞,13-14传代,均匀铺在培养皿/瓶中,置于37℃5%CO2 条件下培养。

注意:细胞传代所需的时间:2-4天。5代及之前的细胞,生长速度较快。5代以后的细胞,生长速度稍缓。

hMSC细胞冻存

1.  细胞达到80-90%汇合度, 吸走旧的人类间充质干细胞培养基(AC-1001003,并且加入PBS溶液清?#30784;?/span>

2.     加入人类间充质干细胞消化液AC-1001024/1001025使之完全覆盖皿/瓶底,室温孵育5-8分钟或37℃孵育3-5分钟,显微镜下观察到大部分克隆边缘开始脱离皿/瓶底,克隆内部细胞间出现间隙,停止消化。

3.     加入与消化液2倍体积的人类间充质干细胞培养基(AC-1001003中和消化,用移液器轻轻?#33633;?#29942;壁上未完全脱离的细胞,并轻轻?#33633;?#28151;匀,使细胞完全分散,将细胞悬液转移到15 mL离心管中,1000 rpm离心3 min,吸掉上清。

4.     缓慢加入适量Serum-free细胞冻存液AC-1001005/1001006,调整细胞密度在1×106 cells/mL左右,每支冻存管分装1.5-2ml

5.     轻轻地重悬细胞,将重悬均匀的细胞按等份加入到无菌冻存管(需提?#30333;?#22909;标记)中,旋紧冻存管盖

6.     直接放入-80℃,一天或两天后放入液氮中长期保存。

质量控制

 


指  标


澄清

颜色


培养基为红色,添加剂为橙黄色

pH


7.0-7.4

渗透压 mOsmol/kg


280-320

EU/ml

培养基


<0.25

添加剂


<0.25

微生物限度


无菌试验?#32454;瘢?/span>0.1μm过滤

细胞生长试验

形态


细胞为梭形,呈指纹状或旋涡状生长

细胞生长试验


?#32454;?/span>


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